Identificación y caracterización de nuevos moduladores de trpm8

Abstract

Los receptores de potencial transitorio (TRP) desempeñan una gran cantidad de funciones fisiológicas y patológicas en respuesta a estímulos tanto extracelulares como intracelulares. Dentro de esta familia, hay un grupo que responde a cambios de temperatura, denominado termoTRP, donde se encuentra el canal TRPM8, el cual es el objeto de estudio de trabajo. El canal TRPM8, es un canal polimodal catiónico no selectivo permeable a calcio, propuesto como el principal receptor del frío inocuo, sensible a temperaturas suaves y a compuestos refrescantes naturales y sintéticos. Se expresa en varios tejidos del cuerpo humano y tiene implicación en gran variedad de procesos fisiológicos y, por tanto, una alteración de su expresión o disfunción provoca múltiples enfermedades. Los moduladores específicos de este canal, siguen siendo hoy en día una necesidad clínica, por ello, el objetivo general de este trabajo fue la caracterización de moduladores TRPM8 mediante ensayos de cribado, potencia, citotoxicidad y especificidad en modelos in vitro. Se parte de una familia de 8 compuestos, los cuales presentaron actividad antagonista frente a TRPM8, mostrando una potencia en el rango micromolar. El compuesto 1 el más potente de todos con una IC50 de 0,07 ± 0,03 μM y el que menor toxicidad presentó, por tanto, es el compuesto con mejor perfil farmacológico. Además, estos compuestos también modulan a los canales TRPV1. Por último, la caracterización completa mediante electrofisiología de los antagonistas con mejores propiedades permitirá su posterior desarrollo mediante ensayos preclínicos y clínicos futuros.

The transient receptor potential (TRP) plays many physiological and pathological roles in response to extracellular and intracellular stimulation. In this family, there is a group that responds to temperature changes, the thermoTRP group, where the TRPM8 channel is located, which is the subject of this study. The TRPM8 channel is a non-selective cationic polymodal calcium-permeable channel, proposed as the main receptor of harmless cold, sensitive to soft temperatures and to natural and synthetic cooling compounds. It is expressed in several tissues of the human body and is involved in a wide variety of physiological processes and, therefore, an alteration of its expression or dysfunction causes multiple diseases. Specific modulators of this channel remain a clinical necessity today, therefore, the global aim of this work was to characterise TRPM8 modulators by screening, potency, cytotoxicity and specificity assays in vitro models. A family of 8 compounds was used, all of them showed antagonistic activity against TRPM8, with potency in the micromolar range. The compound 1 being the most potent of all with an IC50 of 0.07 ± 0.03 μM and the one with the lowest toxicity, thus being the compound with the best pharmacological profile. In addition, these compounds also modulate TRPV1 channels. Finally, full characterisation by electrophysiology of the antagonists with the best properties will allow further development in future preclinical and clinical trials.