Caracterización de un alelo mutante por inserción de T-DNA en el gen U1-70K de Arabidopsis thaliana

Abstract

Los organismos modelo facilitan el estudio de fenómenos biológicos y la obtención de resultados y conclusiones extrapolables a otras especies. El principal organismo modelo en las plantas es Arabidopsis thaliana (Arabidopsis). La actividad HUA-PEP de Arabidopsis impide la terminación y poliadenilación prematuras en intrones grandes, un fenómeno similar al descrito en animales con el nombre de telescripting, del que es responsable la snRNP U1, conocida previamente por su función en el reconocimiento del sitio 5’ de splicing. En un intento de comprobar si la snRNP U1 también está implicada en el fenómeno observado en las plantas, se plantea inicialmente la caracterización genética del gen U1-70K de Arabidopsis, que codifica la proteína de 70 kDa, esencial para la función de la snRNP U1. Se ha analizado una línea de Arabidopsis con una posible inserción de T-DNA en el gen, determinándose que esta línea contiene una única inserción localizada en el sexto intrón, muy probablemente inactivando completamente la función. La mutación tiene un comportamiento letal y presenta baja transmisión a través del gametofito femenino, indicativo de que la ausencia de la proteína muy probablemente también resulta letal durante la fase haploide. El alelo mutante se comporta completamente como recesivo, no observándose ningún fenotipo mutante en el heterocigoto, ni siquiera sutiles fenotipos alterados en el tiempo de floración, como sí ocurre en los mutantes simples para la actividad HUA-PEP. También se determinó la expresión relativa del gen, observándose que el heterocigoto tiene niveles de expresión comparables a los del homocigoto silvestre, lo que sugiere que el gen U1-70K está sometido a mecanismos de regulación muy estrictos para que sus niveles de expresión sean similares en las dos copias funcionales del homocigoto silvestre en relación con la única copia del heterocigoto.