Autofagia como mecanismo de protección frente al virus de la septicemia hemorrágica vírica en eritrocitos de trucha arcoíris

Abstract

La industria acuícola se encuentra amenazada por las enfermedades que producen los patógenos virales, causando graves pérdidas económicas en el sector. Es necesario encontrar diversas estrategias antivirales y es aquí donde los eritrocitos (glóbulos rojos, red blood cells, RBCs) pueden jugar un papel importante. En este trabajo, se ha estudiado como los RBCs de teleósteos son capaces de responder mediante distintos mecanismos antivirales a la exposición al virus de la septicemia hemorrágica vírica (VHSV). Tanto por PCR cuantitativa como por citometría de flujo, se pudo observar un aumento en la actividad autofágica en RBCs de trucha arcoíris tras ser expuestos a VHSV ex vivo. Según los resultados obtenidos, se ha podido observar que compuestos como 3-MA o niclosamida, capaces de modular la actividad autofágica, producen variaciones en la cantidad de VHSV intracelular. Además, observamos un aumento de ubiquitinación de proteínas en RBCs de trucha arcoíris expuestos al virus. Por otro lado, los resultados obtenidos sobre la cuantificación de proteína p62 (también denominada secuestosoma 1) indican que está involucrada en el transporte de proteínas ubiquitinadas hacia los autofagosomas. Además, VHSV es capaz de inducir la expresión de genes de respuesta antioxidante en los RBCs. De acuerdo con los resultados obtenidos, podemos concluir que los RBCs de trucha arcoíris son capaces de desarrollar respuestas antivirales frente a VHSV mediadas por el sistema de autofagia.

Aquaculture industry is threaten by viral pathogen diseases, causing severe economic losses in this field. It is necessary to find novel antiviral strategies and here the erythrocytes (red blood cells, RBCs) play an important role. In this work, it has been studied how teleost RBCs are able to respond to the exposure to viral hemorrhagic septicemia virus (VHSV) by different antiviral mechanisms. An increament in autophagic activity could be observed in rainbow trout RBCs after being exposed to VHSV ex vivo, by means of quantitative PCR and flow cytometry. According to the obtained results, compounds such as 3-MA or niclosamide, were capable of modulating autophagic activity, producing variations in the amount of intracellular VHSV. In addition, we observed an increment in cellular proteins ubiquitination in rainbow trout RBCs exposed to the virus. On the other hand, the results obtained on the quantification of protein p62 (also called sequestosoma 1) indicated that this protein is involved in the transport of ubiquitinated proteins towards autophagosomes. Furthermore, VHSV is able to induce the expression of antioxidant response genes in RBCs. According to the obtained results, we could conclude that rainbow trout RBCs were able to develop antiviral responses against VHSV, by means of the autophagy system.