Evaluación del silenciamiento del receptor de estrógenos beta sobre la expresión génica de marcadores de identidad de célula-beta en la línea celular INS1-E

Abstract

La diabetes mellitus se caracteriza por la pérdida progresiva de la masa y funcionalidad de las células-β pancreáticas. Entre los factores implicados en su mantenimiento destaca el receptor de estrógenos β (ERβ), aunque su papel específico en la identidad celular y en la respuesta a la glucotoxicidad aún no se conoce completamente. El objetivo de este trabajo fue establecer un protocolo eficaz de silenciamiento de Esr2, gen que codifica la proteína del receptor de estrógenos ERβ , mediante siRNA en células INS-1E y analizar las consecuencias de la ausencia de ERβ sobre marcadores de identidad de la célula-β y de estrés de retículo endoplásmico. Los resultados mostraron que el protocolo de doble transfección redujo la expresión de Esr2 aproximadamente un 50 %. La pérdida de ERβ indujo un aumento en la expresión de los genes Mafa y Pdx1, mientras que Nkx6.1 no mostró cambios significativos. Por el contrario, la expresión de Ins1 disminuyó tras el silenciamiento del receptor. Respecto al estrés de retículo endoplásmico, no se observaron cambios en la expresión de los marcadores Hspa5 (BiP) y Ddit3 (CHOP) tras la exposición a 25 mM de glucosa durante 6 horas. En conjunto, estos resultados sugieren que ERβ podría participar en el mantenimiento de la identidad de la célula β pancreática.

Diabetes mellitus is characterized by the progressive loss of pancreatic β-cell mass and function. Among the factors involved in their maintenance, the estrogen receptor β (ERβ) stands out, although its specific role in cell identity and the response to glucotoxicity is not yet fully understood. The aim of this study was to establish an effective siRNA silencing protocol for Esr2 in INS-1E cells and to analyze the consequences of ERβ absence on β-cell identity markers and endoplasmic reticulum stress. The results showed that the double transfection protocol reduced Esr2 expression by approximately 50%. ERβ loss induced an increase in the expression of the Mafa and Pdx1 genes, while Nkx6.1 showed no significant changes. Conversely, Ins1 expression decreased after receptor silencing. Regarding endoplasmic reticulum stress, no changes were observed in the expression of the Hspa5 (BiP) and Ddit3 (CHOP) markers after exposure to 25 mM glucose for 6 hours. Taken together, these results suggest that ERβ is involved in maintaining pancreatic β-cell identity and highlight the complexity of the mechanisms that regulate gene expression in these cells.