The Effects of Age and Induced Tear-deficiency On Corneal Structure and Function

Abstract

La córnea es la superficie más anterior del ojo y lo protege contra posibles daños. Para ello posee la inervación sensorial más rica del cuerpo, dedicada a detectar estímulos nocivos que iniciarán reflejos protectores y que además cumple funciones tróficas; esta inervación está también sometida a un continuo reajuste. Aunque no sólo hay nervios sensoriales en la córnea, su densidad puede ser considerada directamente proporcional a la sensibilidad corneal; por eso, cualquier cambio en su densidad puede influir en sus funciones sensoriales y tróficas. El objetivo de esta Tesis es examinar el efecto del desarrollo hasta la edad adulta y de la deficiencia lacrimal sobre la morfología, el trofismo y la actividad sensorial de la inervación corneal en la cobaya. Las alteraciones morfológicas de los nervios corneales fueron estudiadas en distintos grupos de edad (1-12 meses) y 1, 3 y 8 meses después de la ablación de la glándula lacrimal. Los ojos se tiñeron con ß-tubulina neuronal clase III, utilizando la técnica de inmunoperoxidasa e inmunofluorescencia, y luego se analizó la proporción de fibras de nervios subbasales, su número, su densidad y la longitud de los haces de nervios subbasales y la densidad de las terminaciones de los nervios epiteliales. Los parámetros fueron cuantificados en la córnea entera o en diferentes zonas del cuadrante superior de la córnea. Para estudiar la función trófica de los nervios corneales se provocaron úlceras en el epitelio corneal, utilizando n-heptanol, y la evolución de su curación fue estudiada regularmente, calculando el ratio de migración epitelial y el tiempo estimado de recuperación del epitelio. Para analizar los cambios en la actividad sensorial de los nervios corneales se usaron registros electrofisiológicos extracelulares y se estudiaron tanto la actividad espontánea como la evocada. La arquitectura de los nervios corneales cambió con la edad, mostrando una reducción en la densidad de los nervios subbasales y epiteliales con el tiempo. Ello podría contribuir a un enlentecimiento neurotrófico en la curación de las úlceras corneales. Estas úlceras se recuperaron más rápido en los animales jóvenes, posiblemente como resultado de una inervación corneal más profusa, que tiene su pico de densidad nerviosa a la edad de 2 meses. A pesar de ello, las características de la actividad espontánea y evocada por la estimulación corneal, así como el ratio de lacrimación, son similares en los animales jóvenes y en los adultos. En las cobayas lácrimo-deficientes hubo alteraciones en la morfología de la inervación corneal, lo que sugiere una lesión de los nervios y su regeneración con el tiempo. Los cambios observados en la arquitectura de los nervios subbasales 1 mes después de quitar la glándula lacrimal sugieren que el daño de los nervios se desarrolla poco después de inducir la lacrimación reducida, provocando un enlentecimiento neurotrófico en la curación de las úlceras corneales. Con el paso del tiempo después de inducir la deficiencia lacrimal, la regeneración de los nervios corneales parece recuperar en parte la capacidad de curación de las úlceras epiteliales de la córnea, así como aumentar el nivel de lacrimación. Al mismo tiempo, de los receptores corneales sólo los receptores de frío desarrollaron cambios significativos en su actividad, demostrando una mayor afectación por la deficiencia lacrimal. Los resultados de esta tesis muestran por primera vez la evolución de la inervación corneal con el desarrollo hasta la edad adulta y después de la inducción de una deficiencia lacrimal en cobaya, demostrando además su impacto en la curación de las úlceras epiteliales de la córnea y en la actividad de los nervios corneales.