Identificación y caracterización de nuevos genes DENTICULATA en Arabidopsis

Abstract

Las hojas de los mutantes denticulata (den) de Arabidopsis son pequeñas, apuntadas e indentadas, rasgos que les hacen candidatos a ser portadores de mutaciones en genes que codifican proteínas implicadas en la traducción. En este trabajo hemos completado la cartografía mediante secuenciación masiva de las mutaciones den1, den4, den7 y den11, y hemos iniciado las de den9, den14, den15, den16 y den17, con el objetivo de identificar sus genes mutados. Los genes ASYMMETRIC LEAVES 1 (AS1) y AS2 codifican factores de transcripción implicados en el establecimiento del eje dorsoventral de las hojas de Arabidopsis, e interaccionan sinérgicamente con algunos genes DEN previamente descritos. Hemos establecido que la mutación as1-14 es una deleción de 5.880 pb, que elimina parte del gen AS1 y la totalidad de los genes adyacentes ACTIN1 (ACT1) y SIAMESE-RELATED12 (SMR12). Con el fin de establecer si el fenotipo morfológico del mutante as1-14 se debe a la disfunción individual o conjunta de estos tres genes, hemos diseñado e iniciado la construcción de transgenes portadores de sus alelos silvestres y obtenido mutantes insercionales act1 y smr12 de colecciones de dominio público.

The Arabidopsis denticulata (den) mutants exhibit small, pointed and dentate leaves, traits that make them candidates to carry mutations in genes encoding proteins involved in translation. In this work, we accomplished the mapping by sequencing of den1, den4, den7 and den11, and initiated that of den9, den14, den15, den16, and den17, in order to identify their mutated genes. The ASYMMETRIC LEAVES 1 (AS1) and AS2 genes encode transcription factors involved in leaf dorsoventral axis specification, and these genes synergistically interact with some DEN genes already described. We found that the as1-14 mutation is a 5,880-bp deletion that spans part of the AS1 gene and the whole ACTIN1 (ACT1) and SIAMESE-RELATED12 (SMR12) genes. To ascertain if the morphological phenotype of the as1-14 mutant is caused by the individual or combined loss of function of these three genes, we designed and initiated the construction of transgenes harboring their wild-type alleles, and obtained insertional mutants from public collections as well.