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Diferenciación de la línea celular MED 17.11 a nociceptores


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Title:
Diferenciación de la línea celular MED 17.11 a nociceptores
Authors:
Rodrigo Quintanar, Imanol
Tutor:
Ferrer Montiel, Antonio Vicente
Artero Morales, Maite
Issue Date:
2017-09-20
Abstract:
El ser humano es capaz de detectar este daño mediante la nocicepción, que es el proceso por el cual las fibras nerviosas aferentes (sensitivas) primarias del sistema somatosensorial detectan los estímulos nocivos. Estas fibras nerviosas aferentes son conocidas como nociceptores o receptores del dolor. La excitabilidad de estas neuronas nociceptivas se encuentra regulada por diferentes canales iónicos. Tanto estas terminaciones nerviosas encargadas de captar y procesar la señal de dolor, como los diversos canales iónicos que regulan su actividad, se han convertido en dianas terapéuticas con la finalidad de la creación de nuevos fármacos frente al dolor. En este trabajo se ha diferenciado la línea celular MED17.11 a nociceptores. Se ha buscado la expresión de ARNm de algunos marcadores neuronales mediante técnicas de RT-PCR, aunque no se ha observado expresión de marcadores de nociceptores adultos. También se ha investigado la funcionalidad de TRPV1 mediante imagen de calcio, obteniendo alguna respuesta a capsaicina y ATP pero sin respuesta a despolarización por pulsos de KCl, indicándonos que el protocolo de diferenciación usado no se traduce en un fenotipo neuronal completo. Para conseguir una expresión fija de marcadores de nociceptores adultos, así como funcionalidad neuronal estable, es necesario adaptar los protocolos de diferenciación para conseguir una diferenciación a nociceptores óptima.
The human are able to detect and prevent tissue damage through nociception, which is the process by which the primary afferent (sensory) nerve fibers of the somatosensory system detect harmful stimuli. These afferent nerve fibers are known as nociceptors or pain receptors. The excitability of these nociceptive neurons is regulated by different ion channels. Both these nerve endings in charge of capturing and processing the pain signal, as well as the various ion channels that regulate its activity, have become therapeutic targets for the purpose of creating new drugs against pain. In this study the cell line MED17.11 has been differentiated to nociceptors. The expression of mRNA of several neuronal markers has been investigated by RT-PCR techniques, although expression of adult nociceptor markers has not been observed; and the functionality of the TRPV1 channels was examined by calcium image, obtaining few response to capsaicin and ATP but without response to KCl pulses, indicating that differentiated neurons lack in terms of action potential neuronal functionality. To achieve expression of adult nociceptor markers as well as stable neuronal functionality, it will be necessary to customize the differentiation protocols for achieving proper nociceptor differentiation.
Keywords/Subjects:
Nociceptor
Dolor
Marcador
Type of document:
application/pdf
Access rights:
info:eu-repo/semantics/openAccess
Appears in Collections:
TFG - Biotecnología



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