Estudios de interferencia viral en líneas celulares de peces Cipriniformes y Perciformes

Abstract

En investigaciones previas se consiguió caracterizar la línea EPC de carpa (Cipriniformes) infectada persistentemente con la cepa Sp (europea) de IPNV (EPCIPNV-Sp) y se demostró su resistencia frente a virus heterólogos como VHSV y que secreta al medio factores que inducen protección frente a superinfecciones. En este trabajo se perseguía utilizar una cepa de diferente origen geográfico de IPNV para estudiar si el fenómeno de interferencia viral era específico de cepa. Se escogió la cepa LWVRT60 (americana), para establecer una infección persistente en células EPC (EPCIPNV-LW). Además, se generaron líneas persistentemente infectadas de un grupo distinto de peces (Perciformes). Se utilizó para ello la línea celular SAF de dorada (SAFIPNV-Sp y SAFIPNV-LW) y se comprobó que las características de éstas eran similares a las de EPCIPNV-Sp y EPCIPNV-LW puesto que también son resistentes ante infecciones de VHSV. Se probó también si las cuatro líneas portadoras de IPNV resistían infecciones de otros rhabdovirus, como el SVCV. En ensayos de formación de calvas se comprobó que, efectivamente, eran resistentes a SVCV. Además, se ha constatado que los medios condicionados de estas líneas celulares inducen resistencia ante VHSV.

Previous studies successfully characterised the cell line EPC from carp (cyprinid) persistently infected with the Sp strain (European) of IPNV (EPCIPNV-Sp). Its resistance against heterologous viruses, such as VHSV, was proved along with their capacity of antiviral factors secretion that induce cell protection against superinfections. In this project, the objective was to use an IPNV strain from a different geographic area in order to study whether the viral interference phenomenon was strain-specific or not. The chosen strain to infect persistently EPC cells was an American one corresponding to LWVRT60 (EPCIPNV-LW). In addition, persistently infected cell lines from a different group of fish (perciform) were generated using the cell line SAF from gilt-head bream (SAFIPNV-Sp y SAFIPNV-LW) and it was proven that their characteristics are very similar to the cell lines EPCIPNV-Sp and EPCIPNV-LW as they also show resistance against VHSV infections. It was also proved that the four IPNV-carrier cell lines also resisted other rhabdovirus infections, such as SVCV. Plaque assays confirmed that the four cell lines were resistant to superinfection with SVCV. The antiviral activity of conditioned media from IPNV-carrier cell lines was also tested. As a result, these media are able to induce protection against VHSV in susceptible cells.