Epidemiología molecular de pseudomonas aeruginosa mediante la técnica double-locus sequence typing (DLST)

Abstract

Antecedentes: Pseudomonas aeruginosa es uno de los principales microorganismos aislados en infecciones nosocomiales. La prevalencia de cepas multirresistentes (MDR) o extremadamente resistentes (XDR) ha aumentado de manera global en las últimas décadas. Una herramienta para prevenir la aparición de estas resistencias es la vigilancia epidemiológica, ya que se ha observado que a nivel local existen perfiles MDR/XDR definidos. El presente estudio surgió a raíz de un brote de infecciones por P. aeruginosa multirresistente ocurrido en el Servicio de Nefrología del Hospital General Universitario de Alicante. Objetivo: Evaluar la utilidad de la técnica double-locus sequence typing (DLST) para la caracterización de brotes hospitalarios producidos por P. aeruginosa. Materiales y métodos: Estudio de caracterización genética de cepas P. aeruginosa. Los casos fueron 24 cepas asociadas al brote del Servicio de Nefrología producido entre febrero y agosto de 2017. Se utilizaron como controles 22 cepas de P. aeruginosa elegidas al azar durante agosto del mismo año que procedían de pacientes ingresados en otros servicios del hospital y sin relación conocida con el brote. El protocolo de trabajo fue: (i) extracción del ADN bacteriano, (ii) amplificación de los loci ms172 y ms217, (iii) visualización de los fragmentos por electroforesis en gel de agarosa (iv) purificación del ADN y (v) secuenciación Sanger. También se construyó un árbol filogenético y se estudió el antibiograma. Resultados: Se alcanzó una tipificación del 100%. Todas las cepas de los casos fueron clasificadas bajo el mismo tipo DLST (52-44). En cuanto a las cepas control, hubo gran variedad alélica y se descubrió una nueva variante alélica para cada locus: el alelo 124 para el ms172 y el alelo 202 para el ms217. Conclusiones: Se confirma que la técnica DLST es útil, rápida, sencilla y poco costosa para la detección de brotes hospitalarios por P. aeruginosa.