Evaluación del efecto antinociceptivo producido por un inhibidor de la recaptación de la anandamida y la morfina administrados por vía intradural en un modelo de dolor postincisional en ratas

Abstract

Esta tesis evalúa el efecto antinociceptivo producido por la combinación de UCM707, un inhibidor de la recaptación de la AEA, y la morfina administrados por vía intradural (IT) en un modelo experimental de dolor postoperatorio (DPO). Para ello emplea un modelo de dolor postincisional en ratas administrando dosis subefectivas de los 2 compuestos previamente determinadas mediante un test de placa caliente. La evaluación de la nocicepción se realizó mediante pruebas conductuales tras administración de la solución a estudio y antagonistas específicos encaminados a investigar los mecanismos moleculares subyacentes. Se emplearon técnicas de autorradiografía de unión de [35S]GTPS estimulada por WIN-55,940 y DAMGO en diferentes regiones del SNC y se analizó la expresión génica de diferentes receptores involucrados en la modulación del dolor (receptor Opioide Mu 1-Oprm1-, receptor cannabinoide tipo 1- Cnr1-, receptor cannabinoide tipo 2- Cnr2- y receptor de potencial transitorio vaniloide 1 -TRPV1-). La coadministración IT de dosis subefectivas de morfina (1 g) y UCM707 (75 g) induce un efecto antinociceptivo robusto y prolongado para el alivio del dolor postincisional en ratas. Este efecto es comparable al producido por una dosis efectiva de morfina (5 g), con un pico máximo de analgesia a los 30 minutos y una reducción progresiva de la antinocicepción que desaparece a las 4 horas. La combinación de la solución IT incrementa la expresión de los receptores Cnr1, Cnr2 y TRPV1 en la médula espinal sin cambios en la expresión del receptor Oprm1. El uso de antagonistas específicos demuestra que la antinocicepción inducida por la combinación depende del receptor -opioide (µ-OR) y del receptor cannabinoide tipo 1 (CB1r) en las fases iniciales del DPO, mientras que el receptor cannabinoide tipo 1 (CB2r) y el receptor de potencial transitorio vaniloide 1 (TRPV1) son más relevantes en etapas tardías. Esto subraya la importancia de la temporalidad en la activación de diferentes receptores y su impacto en la eficacia antinociceptiva. Observaciones adicionales son: 1) CB1r ejerce una acción nociceptiva el cuarto día postoperatorio. 2) El receptor TRPV1 está implicado tanto el primer como el cuarto día postoperatorio. En conclusión, esta tesis proporciona evidencia que la modulación del SEC mediante UCM707 potencia la analgesia de la morfina IT. Ello permite reducir su dosis y minimizar los efectos secundarios asociados al uso de opioides. Estos hallazgos abren nuevas perspectivas para el manejo multimodal del DPO y destacan la necesidad de estudios clínicos para validar esta estrategia en humanos, así como su posible aplicación en otros tipos de dolor. / This thesis evaluates the antinociceptive effect produced by the combination of UCM707, an EAA reuptake inhibitor, and morphine administered intrathecally (IT) in an experimental model of postoperative pain (POP). For this purpose, a postincisional pain model is used in rats by administering sub-effective doses of the 2 compounds previously determined by means of a hot plate test. The evaluation of nociception was performed by means of behavioral tests after administration of the solution under study and specific antagonists aimed at investigating the underlying molecular mechanisms. WIN-55,940- and DAMGO-stimulated [35S]GTPγS binding autoradiography techniques were used in different CNS regions and the gene expression of different receptors involved in pain modulation (Opioid Mu 1-Oprm1-, cannabinoid receptor type 1- Cnr1-, cannabinoid receptor type 2- Cnr2- and transient receptor potential vanilloid 1 -TRPV1-) was analyzed. IT coadministration of sub-effective doses of morphine (1 μg) and UCM707 (75 μg) induced a robust and prolonged antinociceptive effect for postincisional pain relief in rats. This effect is comparable to that produced by an effective dose of morphine (5 μg), with a maximum peak of analgesia at 30 minutes and a progressive reduction of antinociception that disappears at 4 hours. The combination of IT solution increases the expression of Cnr1, Cnr2 and TRPV1 receptors in the spinal cord without changes in the expression of the Oprm1 receptor. The use of specific antagonists demonstrates that the combination-induced antinociception depends on the μ-opioid receptor (μ-OR) and the cannabinoid receptor type 1 (CB1r) in the early stages of OPD, whereas the cannabinoid receptor type 1 (CB2r) and the transient receptor potential vanilloid 1 (TRPV1) are more relevant in late stages. This underlines the importance of temporality in the activation of different receptors and its impact on antinociceptive efficacy. Additional observations are: 1) CB1r exerts a nociceptive action on postoperative day 4. 2) The TRPV1 receptor is involved on both the first and fourth postoperative day. In conclusion, this thesis provides evidence that modulation of SEC by UCM707 potentiates IT morphine analgesia. This allows reducing its dose and minimizing the side effects associated with opioid use. These findings open new perspectives for the multimodal management of OPD and highlight the need for clinical studies to validate this strategy in humans, as well as its possible application in other types of pain.