Asociación de genes relacionados con la resistencia a radioterapia y genes implicados en la división asimétrica de células madre tumorales

Abstract

En el presente trabajo se ha llevado a cabo el estudio de algunos genes homólogos en humanos relacionados con el proceso de división celular asimétrica de células madre neurales en Drosophila melanogaster y su posible papel en glioblastoma multiforme. En concreto hemos establecido una conexión entre los niveles de expresión de estos genes y la adquisición de resistencia a la radioterapia. Los genes que se han estudiado han sido MLLT4, TRIM2 y RAP2A Los resultados obtenidos revelan que TRIM2 y RAP2A aumentan su expresión en respuesta a la irradiación en cultivos primarios de glioblastoma obtenidos a partir de los aspirados quirúrgicos de los pacientes operados en el Hospital General Universitario de Elche. Interesantemente también se observa que al obtener poblaciones clonales radiorresistentes mediante irradiación secuencial del cultivo primario HGUE-GB-39, dichas poblaciones muestran un incremente significativo en la expresión de RAP2A, TRIM2 y MLLT4. Experimentos realizados en paralelo para obtener un segundo modelo de resistencia, mediante la utilización de siRNAs contra SOCS1 y SOCS3 (genes relacionados con la radiorresistencia en trabajos previos), mostraron que la inhibición de la expresión de estos genes en el cultivo HGUE-GB-39 correlacionaba con la adquisición de radiorresistencia y con un aumento en la expresión de RAP2A, TRIM2 y MLLT4. Los resultados obtenidos sugieren que RAP2A, TRIM2 y MLLT4 pueden jugar algún papel en la adquisición de radiorresistencia en glioblastoma.

In this work we have studied several homologous human genes related to genes involved in neural asymmetric cell division in Drosophila melanogaster and their putative role in multiform glioblastoma. In particular we have established a relationship between the expression levels of those genes and radiotherapy resistance acquisition. The studied genes are MLLT4, TRIM2 and RAP2A. Our results indicate that expression of TRIM2 and RAP2A increase after iradiation of glioblastoma primary cultures obtained from surgical washes of glioblastoma patients at the Hospital General Universitario de Elche. Interestingly, we have also observed that isolated clonal populations resistant to radiotherapy obtained through sequential radiation of the primary culture HGUE-GB-39, show a significant increase in RAP2A, TRIM2 and MLLT4 expression. Experiments performed in parallel in order to obtain a different resistance model, through transient transfection with specific siRNAs for SOCS1 and SOCS3 (genes previously reported to be related to radiorresistance), indicate that inhibition of SOCS1 and SOCS3 expression in HGUE-GB-39, correlates with radiorresistance acquisition as well as with an increase in RAP2, TRIM2 and MLLT4 expression.