Caracterización inmunofenotípica y molecular de la leucemia mielomonocítica crónica. Implicaciones en la práctica clínica, diagnóstico diferencial y estratificación de la enfermedad

Abstract

Los avances recientes en diferentes técnicas de diagnóstico avanzado están permitiendo profundizar en el conocimiento de la biología de las diferentes neoplasias hematológicas y trasladar los conocimientos adquiridos a la práctica clínica. Con el objetivo de investigar la utilidad de la citometría de flujo (CMF) y la secuenciación masiva de última generación (NGS) en la leucemia mielomonocítica crónica (LMMC) hemos diseñado un estudio retrospectivo analizando muestras de controles sanos, monocitosis persistentes, pacientes con LMMC y de diferentes neoplasias hematológicas por ambas técnicas. Nuestros resultados muestran que los monocitos de pacientes con LMMC poseen una firma fenotípica prácticamente propia (partición anormal de sus poblaciones maduras) muy diferente a los controles sanos y al resto de patologías estudiadas. Además, aunque no existen mutaciones específicas, describimos un perfil mutacional muy característico de la LMMC dominado por mutaciones múltiples en genes relacionados con la epigenética y el splicing. Ambas características (partición anormal y paisaje mutacional) se relacionan estrechamente y están presentes en un porcentaje significativo de pacientes con monocitosis crónicas persistentes, postulándose que estos últimos podrían corresponder a formas iniciales de LMMC. Además, los hallazgos descritos pueden ser de gran utilidad en el diagnóstico diferencial de la LMMC respecto otras neoplasias hematológicas con posible participación monocítica. La citometría permite cuantificar de forma objetiva y reproducible las poblaciones inmaduras en médula ósea estratificando mejor a los pacientes en relación al grupo de riesgo molecular que el sistema de estadiaje tradicional basado en el contaje de blastos por técnicas morfológicas. Por último, aunque se demuestra que la CMF y la NGS resultan de gran utilidad en el cribaje, diagnóstico diferencial y en la estratificación de la LMMC, se discute la necesidad de un uso protocolizado de las mismas para su aplicación racional e implementación en la rutina clínica.

Recent advances in different advanced diagnostic techniques are allowing to deepen the knowledge of the biology of the different hematological malignancies and to transfer the knowledge acquired to clinical practice. In order to investigate the usefulness of flow cytometry (FCM) and next-generation massive sequencing (NGS) in chronic myelomonocytic leukemia (CMML), we have designed a retrospective study analyzing controlled healthy samples, persistent monocytosis, patients with CMML and different hematological malignancies by both techniques. Our results show that the monocytes of patients with CMML have a phenotypic signature practically on their own (abnormal partition of their mature populations), very different from the controlled healthy samples and other pathologies studied. In addition, although there are no specific mutations, we describe a characterized mutational profile of CMML dominated by multiple mutations in genes related to epigenetics and splicing. Both characteristics (abnormal partition and mutational landscape) are closely related and are present in a significant percentage of patients with persistent chronic monocytosis, postulating that the latter could correspond to initial forms of CMML. Furthermore, the findings described may be beneficial in the differential diagnosis of CMML with respect to other hematologic malignancies with possible monocytic involvement. Flow cytometry allows to quantify in an objective and reproducible way the immature populations in bone marrow, stratifying patients better in relation to the molecular risk group than the traditional staging system based on blast counting by morphological techniques. Finally, although it is demonstrated that FCM and NGS are beneficial in screening, differential diagnosis and stratification of CMML, the need for protocolized use of them for their rational application and implementation in clinical routine is debatable.