https://hdl.handle.net/11000/1297 2026-04-03T17:19:27Z 2026-04-03T17:19:27Z Moreno Lozano, Victor https://hdl.handle.net/11000/39119 2026-02-06T02:05:55Z 2026-02-05T09:32:54Z

Título : Evaluación de la neurotoxicidad de paclitaxel y oxaliplatino sobre canales TRP en un modelo in vitro compartimentalizado Autor : Moreno Lozano, Victor Resumen : La neuropatía periférica inducida por quimioterapia (CIPN) es un efecto adverso frecuente y limitante del tratamiento oncológico, con una incidencia estimada entre el 30 y el 60¿% en pacientes tratados con fármacos como paclitaxel u oxaliplatino. Se manifiesta con dolor, parestesias o hipersensibilidad, y los tratamientos actuales resultan poco eficaces. Dado que los modelos animales tradicionales presentan limitaciones para estudiar los mecanismos celulares implicados, es necesario desarrollar nuevas estrategias experimentales. En este trabajo se utilizó un modelo in vitro microfluídico compartimentalizado para analizar el efecto de paclitaxel y oxaliplatino sobre neuronas sensoriales de ganglios de raíz dorsal (DRGs). Se evaluó la viabilidad neuronal a largo plazo, la respuesta funcional a estímulos específicos mediante imagen de calcio, y la morfología axonal. El paclitaxel indujo una clara retracción axonal, lo que redujo el número de axones disponibles para el análisis funcional. Aun así, se observó un aumento significativo en la respuesta a capsaicina (TRPV1) y una tendencia de mayor reactividad a AITC (TRPA1), sugiriendo una sensibilización funcional posiblemente relacionada con el estrés celular. Por su parte, el oxaliplatino generó una hiperrespuesta a AITC sin alteraciones morfológicas destacables. Estos resultados ponen de relieve mecanismos diferenciales de neurotoxicidad asociados a ambos fármacos y destacan el valor del modelo microfluídico para estudiar la CIPN. Asimismo, abren nuevas vías para el desarrollo de tratamientos dirigidos a canales iónicos y estrategias que favorezcan la regeneración axonal frente al daño inducido por paclitaxel.

2026-02-05T09:32:54Z Cortell Mera, Sara https://hdl.handle.net/11000/37752 2025-10-29T02:06:27Z 2025-10-28T13:31:38Z

Título : Evaluación de inhibidores de proteínas JAK en células mononucleares de sangre periférica para el tratamiento de la diabetes tipo 1 Autor : Cortell Mera, Sara Resumen : La diabetes tipo 1 (DT1) es una enfermedad autoinmune crónica que se caracteriza por la destrucción específica de las células β pancreáticas por el sistema inmune. En personas genéticamente susceptibles, este diálogo culmina con la destrucción de las células β, lo que lleva a una insuficiencia en la secreción de insulina. Pese a ser una de las enfermedades autoinmunes más estudiadas, a día de hoy la DT1 no tiene cura, y las personas con esta enfermedad sólo pueden sobrevivir gracias a la administración de insulina de manera exógena. Por lo tanto, desarrollar terapias eficaces que puedan prevenir o retrasar el diagnóstico clínico de DT1 constituye una necesidad médica urgente. Una de las estrategias postuladas para prevenir la DT1 son los inhibidores de la ruta de señalización JAK-STAT, la cual media la señalización y la inflamación causada por IFNs. En este proyecto, se propone comparar la eficacia de baricitinib, un inhibidor de la cascada de la familia JAK que ya está en fases clínicas para el tratamiento de la DT1, con deucravacitinib, un inhibidor específico de TYK2. Para esta finalidad, hemos usado las células mononucleares de sangre periférica (PBMCs) de pacientes con DT1 e individuos sin DT1. Los resultados demuestran que las PBMCs constituyen un modelo in vitro válido para evaluar la eficacia de inhibidores de la señalización del IFN, destacando a MX1 y CXCL10 como biomarcadores robustos de respuesta terapéutica en el contexto de la DT1. Además, los resultados obtenidos refuerzan el valor de este enfoque para avanzar hacia estrategias de terapia personalizada, evidenciando diferencias en la eficacia de deucravacitinib y baricitinib según los parámetros analizados. En conjunto, estos hallazgos aportan una base sólida para el uso de PBMCs en la identificación de biomarcadores y en la optimización de terapias personalizadas para la DT1.

2025-10-28T13:31:38Z Montalvà Giménez, Alejandro https://hdl.handle.net/11000/37751 2025-10-29T02:06:26Z 2025-10-28T13:31:25Z

Título : Evaluación del impacto de una mezcla de disruptores endocrinos sobre la viabilidad y funcionalidad de células β expuestas a un mimético de infecciones virales Autor : Montalvà Giménez, Alejandro Resumen : La diabetes tipo 1 (DT1) es una enfermedad autoinmune caracterizada por la destrucción selectiva de las células β pancreáticas. Su incidencia ha aumentado de manera significativa en las últimas décadas, lo que sugiere un papel creciente de factores ambientales más allá de la predisposición genética. Entre ellos, las infecciones virales y la exposición a disruptores endocrinos han sido propuestos como desencadenantes relevantes. El objetivo de este estudio fue evaluar el impacto de una mezcla de disruptores endocrinos sobre la viabilidad y función de las células β, así como su respuesta a un mimético sintético de infección viral (PIC). Para ello, se utilizaron tres líneas celulares de células β pancreáticas (EndoC-βH1, INS-1E y MIN6), expuestas a la mezcla y/o a PIC. Se analizaron la viabilidad celular, la apoptosis, la producción de especies reactivas de oxígeno (ERO), la expresión de marcadores de estrés del retículo endoplasmático (RE) y de proteínas relacionadas con la apoptosis, además de la secreción de insulina estimulada por glucosa. La mezcla de disruptores indujo apoptosis sin alterar la producción de ERO ni la expresión de las proteínas antiapoptóticas Bcl-xL y Bcl-2. El PIC incrementó la apoptosis y la generación de ERO en células INS-1E, y redujo la expresión de Bcl-xL y Bcl-2. El tratamiento combinado con ambos potenció la apoptosis y aumentó la expresión de marcadores de estrés del RE (BiP, Chop, Xbp1s), aunque el pretratamiento con la mezcla no amplificó el efecto del PIC. Ni la mezcla ni el PIC modificaron de forma significativa la secreción de insulina estimulada por glucosa. En conclusión, la exposición a concentraciones ambientalmente relevantes de disruptores endocrinos compromete la supervivencia de las células β, especialmente bajo condiciones de estrés viral, a través de mecanismos asociados a la apoptosis y al estrés del retículo endoplasmático. Estos hallazgos respaldan la hipótesis de que la exposición crónica a mezclas de disruptores podría contribuir a la vulnerabilidad de las células β y al desarrollo de DT1 en individuos con predisposición genética.

2025-10-28T13:31:25Z Allouti, Hichem https://hdl.handle.net/11000/37750 2025-10-29T02:06:25Z 2025-10-28T13:31:10Z

Título : Sex disparities in the emotional impact of chronic non-cancer pain using hierarchical clustering and machine learning tematics Autor : Allouti, Hichem Resumen : Introduction: Chronic Non-Cancer Pain (CNCP) disproportionately affects women and men, not only in prevalence but also in emotional, social, and functional burden. Biological sex differences interact with gender roles and societal expectations. Women report higher emotional distress, sleep disturbances, and caregiving-related limitations, while men face higher work-related disability and underreport emotional suffering due to cultural norms of stoicism. These disparities result in unequal clinical presentations and treatment outcomes, highlighting the need for gender-sensitive categorization and management of CNCP. Objectives: The primary objective was to identify sex-specific emotional impact profiles of CNCP patients through hierarchical clustering and machine learning. Materials and Methods: This mixed-methods study included 216 CNCP patients (69% women) from a Spanish tertiary hospital. Data were collected via structured interviews conducted by four pain experts using clinical scales and the internally validated Gender-Pain Questionnaire. A team of three psychosocial researchers organized and thematically categorized the emotional impact data. Quantitative clustering analyses were conducted using hierarchical clustering (Ward.D2 with Euclidean distance and Gower's method for mixed data) and supported by machine learning thematic classification. Results: 1/ Women were older, more likely to be homemakers or on work disability, and showed trends of higher anxiety. Men were more often prescribed morphine and antidepressants. 2/ Women reported higher reproductive role disruption, while men showed predominance in productive role impact. Mixed roles were more burdensome for women. 3/ For women, three clusters captured physical-emotional overload, psychosocial disconnection, and role-based distress. For men, three clusters highlighted emotional suppression, work-related loss, and social disintegration. 4/ Using weighted mixed data and thematic ML categorization, distinct emotional impact profiles by sex were found, with men clustering around emotional repression and productivity loss, and women around relational suffering and psychosocial vulnerability. Conclusions: This thesis reveals robust sex-based differences in the emotional and functional impacts of CNCP. Women suffer a broader spectrum of emotional strain linked to caregiving and social expectations, while men exhibit underrecognized emotional distress tied to productivity and social withdrawal. Hierarchical clustering combined with ML proved effective in defining distinct emotional profiles, offering valuable insights for implementing gender-sensitive clinical and public health strategies in CNCP care.

2025-10-28T13:31:10Z Alaoiz China, Sarah https://hdl.handle.net/11000/37659 2025-10-16T01:07:41Z 2025-10-15T08:38:41Z

Título : Exploring the Effects of Transcranial Electrical Stimulation on Natural Vision and Cortical Activity Autor : Alaoiz China, Sarah Resumen : Transcranial alternating current stimulation (tACS) is a non-invasive neuromodulation technique that can elicit visual phenomena known as phosphenes and potentially modulate visual cortical processing. This study systematically investigated how tACS parameters—frequency, current intensity, and electrode montage—affect subjective phosphene perception and objective visual evoked potentials (VEPs) in healthy adults. Using a within-subject design, eight participants underwent 40 stimulation conditions while reporting phosphene characteristics and completing pre/post VEP recordings. Results showed that phosphene perception increased with current intensity, peaked at 16 Hz, and was significantly higher with a fronto-central (FPz–Cz) montage compared to occipital (Oz–Cz) stimulation. Phosphene features such as brightness, shape, and spatial location varied systematically with stimulation parameters, while discomfort remained minimal. Although VEP analyses did not reveal statistically significant changes, trends suggested reduced N2 latency post-stimulation, indicating potential enhancement of cortical processing. These findings support the feasibility of tACS as a tool for modulating visual perception and cortical activity, with implications for non-invasive visual rehabilitation.

2025-10-15T08:38:41Z Poveda Pérez, Marina https://hdl.handle.net/11000/37629 2025-10-07T01:07:12Z 2025-10-06T08:03:19Z

Título : Sistema semiautomático de planificación quirúrgica para robots autónomos Autor : Poveda Pérez, Marina Resumen : Este trabajo presenta un sistema semiautomático para la transferencia de la planificación quirúrgica robótica realizada en un entorno 2D/3D, permitiendo complementar las trayectorias definidas manualmente por el cirujano con información adicional de orientación y velocidad, necesaria para su ejecución autónoma por parte de un robot quirúrgico. El sistema incluye una red neuronal para la segmentación semiautomática de los tejidos hepáticos. Para el cálculo de las orientaciones y velocidades del efector del robot, el sistema se basa en el cálculo de normales a la superficie anatómica del órgano segmentado en cada punto de la trayectoria. La solución presentada ha sido implementada como un plug-in de software dentro del proyecto de software libre 3D Slicer y se ha integrado con ROS para su transferencia a un robot UR3e. La validación se ha realizado en un caso de resección del segmento III del hígado, demostrando que el sistema es eficiente, preciso y adecuado para entornos de planificación quirúrgica.; This work presents a semi-automatic system that transfers robotic surgical planning from a 2D/3D environment. This system allows surgeons to manually define trajectories and provides additional orientation and speed information necessary for autonomous execution by a surgical robot. The system includes a neural network for semi-automatic segmentation of liver tissue. To calculate the robot effector's orientations and velocities, the system calculates normals to the anatomical surface of the segmented organ at each point of the trajectory. The solution has been implemented as a software plug-in in the open-source project 3D Slicer and integrated with ROS for transfer to a UR3e robot. Validation was performed for a segment III liver resection, demonstrating that the system is efficient, accurate, and suitable for surgical planning environments.

2025-10-06T08:03:19Z Martínez Cuenca, María https://hdl.handle.net/11000/33330 2024-09-28T01:02:39Z 2024-09-27T12:43:21Z

Título : El efecto del IFNα en la autofagia de las células α y β pancreáticas en la diabetes tipo 1 Autor : Martínez Cuenca, María Resumen : La diabetes tipo 1 (DT1) es una enfermedad autoinmune crónica que representa aproximadamente el 5% de todos los casos de diabetes. Esta patología se caracteriza por la falta casi total de generación de insulina endógena, que ocurre como consecuencia de la destrucción irreversible de aproximadamente el 80% de la masa funcional de células β del páncreas endocrino, provocada por un ataque inmunológico autorreactivo. Se ha establecido que los IFN tipo I (IFN-I), citoquinas que actúan como un vínculo entre los factores genéticos y ambientales que desencadenan la DT1 y que son clave para las respuestas inmunes tanto innatas como adaptativas están implicadas en las primeras etapas de la DT1. Se ha descrito que el IFNα está implicado en la inducción de estrés en el RE, que se ha definido como una de las causas que conduce a la apoptosis de las células β. En este contexto hallazgos recientes indican que el estrés del RE potencia la activación de la autofagia. La autofagia es esencial para mantener la homeostasis de las células β y ha sido identificado como un regulador crítico en la función de estas células tanto en modelos de ratones diabéticos como en pacientes con DT2. Resultados preliminares de nuestro laboratorio muestran una expresión diferencial de genes relacionados con la autofagia en células α y β aisladas de ratón tras el tratamiento con IFNα. En base a estos resultados preliminares, en este Trabajo de Fin de Máster se ha estudiado el papel de la autofagia tras la exposición a IFNα tanto en líneas celulares de células β (MIN-6) como en células α (αTC1-9). Para ello se usaron tratamiento con compuestos moduladores de la autofagia (bafilomicina A1, cloroquina y rapamicina) en combinación con IFNα y, posteriormente, se analizaron proteínas relacionadas con la autofagia (LC3-II y p62) por western blot e inmunofluorescencia y el efecto de la modulación de la autofagia sobre la viabilidad celular. Nuestros resultados sugieren que el IFNα provoca un bloqueo del flujo autofágico en células αTC1- 9, sin embargo, no ejerce un efecto relevante en MIN-6. El ensayo de viabilidad celular indica que la inhibición del flujo autofágico en células α pancreáticas con bafilomicina A1 y cloroquina aumentó la apoptosis, un efecto ligeramente incrementado por la exposición a IFNα. El tratamiento con rapamicina también aumentó la apoptosis, tanto en condiciones basales como con IFNα, pero en menor medida que los inhibidores del flujo autofágico. En células β pancreáticas, la inhibición del flujo autofágico con bafilomicina A1 redujo la viabilidad e indujo apoptosis, mientras que la cloroquina provocó la muerte del 100 % de las células MIN-6, independientemente del tratamiento con IFNα. La rapamicina aumentó ligeramente la apoptosis en condiciones basales, pero con IFNα la disminuyó ligeramente respecto al control.; Type 1 diabetes (T1D) is a chronic autoimmune disease that represents approximately 5% of all diabetes cases. This condition is characterized by an almost total lack of endogenous insulin production, which occurs as a result of the irreversible destruction of about 80% of the functional mass of β-cells in the endocrine pancreas due to an autoimmune attack. It has been established that type I interferons (IFN-I), cytokines that act as a link between genetic and environmental factors that trigger T1D and are key to both innate and adaptive immune responses, are involved in the early stages of T1D. IFNα has been implicated in inducing endoplasmic reticulum (ER) stress, which has been identified as a trigger for β-cell apoptosis. In this context, recent findings indicate that ER stress enhances autophagy. Autophagy is essential for β-cell homeostasis and has been identified as a critical regulator of β-cell function in both diabetic mouse models and patients with type 2 diabetes (T2D). Preliminary results from our laboratory show differential expression of autophagy-related genes in α and β-cells from mice after treatment with IFNα. Based on these preliminary results, this TFM studied the role of autophagy after exposure to IFNα in both β-cell lines (MIN-6) and α-cell lines (αTC1-9). For this purpose, treatments with autophagy-modulating compounds (bafilomycin A1, chloroquine, and rapamycin) were used in combination with IFNα, and subsequently, autophagyrelated proteins (LC3-II and p62) were analyzed by western blot and immunofluorescence, as well as the effect of autophagy modulation on cell viability. Our results suggest that IFNα causes a blockage of autophagic flux in αTC1-9 cells; however, it does not have a notable impact on MIN-6 cells. The cell viability assay indicates that inhibition of autophagic flux in pancreatic α-cells with bafilomycin A1 and chloroquine increased apoptosis, an effect slightly enhanced by exposure to IFNα. Treatment with rapamycin also increased apoptosis, both under basal conditions and with IFNα, but not as significantly as autophagic flux inhibitors. In pancreatic β-cells, inhibition of autophagic flux with bafilomycin A1 reduced viability and induced apoptosis, while chloroquine caused 100% death of MIN-6 cells, regardless of IFNα treatment. Rapamycin slightly increased apoptosis under basal conditions but decreased it slightly with IFNα compared to the control.

2024-09-27T12:43:21Z Pérez Arévalo, Lucía https://hdl.handle.net/11000/33329 2024-09-28T01:02:38Z 2024-09-27T12:31:18Z

Título : Conversión directa de fibroblastos humanos a neuronas del sistema somatosensorial Autor : Pérez Arévalo, Lucía Resumen : Las neuronas sensoriales son células especializadas responsables de detectar y transmitir estímulos del entorno al sistema nervioso central mediante la conversión de señales mecánicas, térmicas y nociceptivas en potenciales de acción. Su morfología distintiva, caracterizada por dendritas que capturan estímulos y axones que transmiten información, es fundamental para la percepción sensorial. No obstante, la investigación en neuronas sensoriales supone desafíos importantes debido a la limitada translacionalidad de los modelos animales al sistema somatosensorial humano. En este contexto, el presente estudio se centra en la transdiferenciación celular, un proceso que permite la conversión de fibroblastos en neuronas funcionales. Empleando células IMR-90, células derivadas del tejido pulmonar de un feto femenino, el objetivo principal es desarrollar y optimizar un protocolo eficaz para la conversión de fibroblastos en neuronas sensoriales humanas, además de la comparación de un protocolo ya establecido. Mediante la expresión dirigida de factores de transcripción y la aplicación de moléculas pequeñas, se busca aumentar la eficiencia de la transdiferenciación y establecer un modelo in vitro ético y relevante para el estudio de la neurobiología sensorial y las neuropatías periféricas. Los resultados preliminares indican que se puede conseguir una transdiferenciación directa de células IMR-90 a neuronas sensoriales utilizando el protocolo de 3ª Generación. Las células mantienen una buena funcionalidad neuronal tras 25 días in vitro, con respuestas robustas a capsaicina, mentol, AITC y KCl. Este trabajo no solo profundiza en la comprensión de la diferenciación celular, sino que también permite la creación de modelos in vitro que replican la fisiología humana. Esto facilita la investigación de enfermedades neurológicas y el desarrollo de terapias personalizadas, representando un avance significativo en los campos de la medicina regenerativa y la biotecnología.; Sensory neurons are specialized cells responsible for detecting and transmitting environmental stimuli to the central nervous system by converting mechanical, thermal, and nociceptive signals into action potentials. Their distinctive morphology, characterized by dendrites that capture stimuli and axons that transmit information, is essential for sensory perception. However, research on sensory neurons poses significant challenges due to the limited translatability of animal models to the human somatosensory system. In this context, the present study focuses on cellular transdifferentiation, a process that enables the conversion of fibroblasts into functional neurons. Using IMR-90 cells, derived from the lung tissue of a female fetus, the main objective is to develop and optimize an effective protocol for converting fibroblasts into human sensory neurons, in addition to comparing it with an already established protocol. By targeted expression of transcription factors and the application of small molecules, the study aims to increase the efficiency of transdifferentiation and establish an ethical and relevant in vitro model for studying sensory neurobiology and peripheral neuropathies. Preliminary results indicate that direct transdifferentiation of IMR-90 cells into sensory neurons can be achieved using the 3rd Generation protocol. The cells maintain good neuronal functionality after 25 days in vitro, showing robust responses to capsaicin, menthol, AITC, and KCl. This work not only deepens the understanding of cellular differentiation but also enables the creation of in vitro models that replicate human physiology. This facilitates the investigation of neurological diseases and the development of personalized therapies, representing a significant advancement in the fields of regenerative medicine and biotechnology.

2024-09-27T12:31:18Z Gil Martín, Guillermo https://hdl.handle.net/11000/33328 2024-09-28T01:02:36Z 2024-09-27T12:29:51Z

Título : Búsqueda de compuestos moduladores del receptor LRH-1 con fines terapéuticos: una aproximación in silico Autor : Gil Martín, Guillermo Resumen : El homólogo del receptor hepático 1 o LRH-1 (Liver Receptor Homologue 1), también conocido como NR5A2, es un receptor nuclear que actúa como factor de transcripción, promoviendo la transcripción de genes implicados en varios procesos como el metabolismo, el crecimiento y la diferenciación celular. Su potencial uso como diana terapéutica ha sido demostrado en múltiples estudios, por lo que el desarrollo de fármacos que tengan como objetivo LRH-1 podría representar una nueva oportunidad para el tratamiento de algunas enfermedades cancerosas, metabólicas e inmunitarias. En este trabajo se han buscado nuevas moléculas que sean capaces de unirse a este receptor mediante una estrategia de cribado virtual, utilizando varios programas de acoplamiento molecular y métodos de acoplamiento consenso que optimizan el rendimiento de esta búsqueda. El objetivo es proponer potenciales activadores o inhibidores del receptor LRH-1 a partir de una librería de compuestos naturales disponibles comercialmente y poder trasladar estas moléculas a ensayos experimentales. Del análisis de los resultados computacionales se proponen 5 ligandos cuyas propiedades farmacocinéticas resultan favorables, sugiriendo así que en un futuro podrían llevarse a cabo bioensayos in vitro e in vivo que verifiquen su potencial terapéutico en el tratamiento de las enfermedades anteriormente mencionadas.; The liver receptor homologue 1 or LRH-1, also known as NR5A2, is a nuclear receptor that acts as a transcription factor, promoting the transcription of genes involved in various processes such as metabolism, growth, and cell differentiation. Its therapeutic potential has been demonstrated in multiple studies, thus, the development of drugs that target LRH-1 could be a new opportunity for the treatment of cancerous, metabolic, and immune diseases. In this work we have searched for new molecules that are capable of binding to this receptor through a virtual screening strategy, using several molecular docking programs and consensus methods that improve search performance. All with the aim of finding potential activators or inhibitors of the LRH-1 receptor from a library of natural compounds commercially available and to be able to bring these molecules to experimental assays. Analyzing the computational results, five candidate ligands whose pharmacokinetic properties are favorable have been proposed, thus suggesting that in the future, in vitro and in vivo bioassays could be carried out to verify their therapeutic potential for the treatment of the aforementioned diseases.

2024-09-27T12:29:51Z Rodríguez Despaigne, Andrea https://hdl.handle.net/11000/33326 2024-09-28T01:02:34Z 2024-09-27T12:27:18Z

Título : Optimización del procesamiento histomorfológico para microscopía electrónica y segmentación automática de imágenes Autor : Rodríguez Despaigne, Andrea Resumen : En el campo de la neurobiología, la optimización de los protocolos histológicos es fundamental para obtener resultados precisos y fiables en el análisis de tejidos nerviosos. Este trabajo se enfocó en mejorar los métodos de fijación y contraste utilizados en el procesamiento histomorfológico del nervio ciático de ratas, un modelo clave en estudios del sistema nervioso periférico. Se demostró que el uso del glutaraldehído, solo o en combinación con el paraformaldehído, es efectivo para la preservación de las estructuras nerviosas. En lo que respecta al contraste, la combinación de osmio reducido con ferricianuro de potasio y tiocarbohidrazida resultó ser más eficaz para teñir las vainas de mielina, aunque presentó limitaciones en la penetración hacia zonas más profundas del tejido. Además, se identificaron desafíos en la precisión de la segmentación automática de axones debido a la calidad del contraste, lo que indica la necesidad de ajustes adicionales tanto en los protocolos experimentales como en el entrenamiento de los algoritmos.; In the field of neurobiology, the optimization of histological protocols is fundamental to obtain precise and reliable results in the analysys of nervous tissue. This work focused on improving the fixation and contrast methods used in the histomorphological processing of the rat sciatic nerve, a key model in studies of the peripheral nervous system. It was demonstrated that the use of glutaraldehyde, either alone or in combination with paraformaldehyde, is effective for the preservation of nervous structures. Regarding contrast, the combination of reduced osmium with potassium ferricyanide and thiocarbohydrazide proved to be more effective for staining myelin sheaths, although it presented limitations in penetration into the deeper regions of the tissue. Additionally, challenges were identified in the accuracy of automatic axon segmentation due to contrast quality, indicating the need for further adjustments in both experimental protocols and algorithm training.

2024-09-27T12:27:18Z